目的 探討短發(fā)夾RNA（shRNA）靶向沉默DLL4基因?qū)CF-7細胞凋亡的誘導及對化療藥物多西他賽的增敏作用。方法 針對DLL4基因的序列設(shè)計具有特異性的shRNA，經(jīng)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染MCF-7細胞，作為實驗組，空脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的MCF-7細胞為脂質(zhì)體組，未做任何處理的MCF-7細胞為對照組。采用免疫細胞化學方法檢測3組細胞DLL4蛋白的表達情況；采用流式細胞儀檢測3組細胞凋亡率及細胞周期改變；采用噻唑藍（methyl- thiazoyl-tetrazolium bromide，MTT）法測定3組細胞的增殖情況及對多西他賽的敏感性。結(jié)果 實驗組平均光密度值及陽性面積率均低于對照組和脂質(zhì)體組（P＜0.01）；實驗組細胞在24h、48h及72h時間點A值均低于對照組和脂質(zhì)體組（P＜0.01）； 轉(zhuǎn)染后24 h、48 h、72 h及96 h，實驗組細胞凋亡率高于對照組和脂質(zhì)體組（P＜0.05）；RNA干擾（RNAi）沉默DLL4基因后，實驗組G2/M期細胞比例高于對照組和脂質(zhì)體組（P＜0.05）；實驗組的IC50值較對照組和脂質(zhì)體組低（P＜0.05）。結(jié)論 RNAi技術(shù)抑制DLL4基因的表達能夠抑制MCF-7細胞的增殖、誘導細胞凋亡及增強細胞對多西他賽作用的敏感性。DLL4可能會成為乳腺癌治療的重要靶點。
目的 分析Delta樣配體4（Delta-like ligand 4，DLL4）及S100鈣結(jié)合蛋白A4（S100 calcium binding protein A4，S100A4）在不同乳腺癌分子亞型組織中的表達并討論其臨床意義。方法 采用免疫組織化學SP法檢測十堰市太和醫(yī)院 Luminal A型乳腺癌組織51例、Luminal B型乳腺癌組織26例、HER-2過表達型乳腺癌組織17例、基底細胞樣型乳腺癌組織14例和乳腺癌癌旁組織40例中DLL4和S100A4的表達情況，并分析其與乳腺癌臨床病理特征之間的關(guān)系。結(jié)果 在乳腺癌組織中，DLL4和S100A4的表達陽性率分別為67.6%（73/108）和62.0%（67/108），均高于其在癌旁組織中的表達陽性率〔22.5%（9/40），45.0%（18/40）〕，P＜0.05。在不同乳腺癌分子亞型組織中，HER-2過表達型和基底細胞樣型乳腺癌組織中DLL4和S100A4的表達陽性率均高于Luminal A型和Luminal B型（P＜0.05）。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者，DLL4和S100A4呈高表達 （P＜0.05）。乳腺癌組織中DLL4表達與S100A4表達呈正相關(guān)關(guān)系（rs=0.217，P＜0.01）。結(jié)論 DLL4和S100A4在基底細胞樣型和HER-2過表達型乳腺癌組織中呈高表達，與預(yù)后相關(guān)。DLL4和S100A4共同參與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展以及浸潤轉(zhuǎn)移過程。臨床聯(lián)合檢測兩種蛋白表達可評估乳腺癌的潛在轉(zhuǎn)移和預(yù)后。
目的檢測乳腺癌及乳腺良性病變患者外周血中人乳腺珠蛋白（human mammary gland globin，hMAM）mRNA的表達，為乳腺癌分子標記選擇提供理論依據(jù)。 方法選取2011年6月至2012年10月期間筆者所在醫(yī)院收治的乳腺癌患者78例以及乳腺良性病變患者30例（乳腺增生癥15例，乳腺纖維腺瘤15例）作為研究對象，應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)檢測其外周血中hMAM mRNA的表達，并分析其與患者年齡、腫瘤大小、病理學類型、腫瘤分期、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及ER、PR和HER-2表達的關(guān)系。 結(jié)果乳腺增生及乳腺纖維腺瘤患者外周血中均未檢出hMAM mRNA表達，乳腺癌患者外周血中hMAM mRNA表達陽性率為48.72%（38/78）其差異有統(tǒng)計學意義（χ2=12.357，P=0.000）。乳腺癌患者外周血中hMAM mRNA的表達與患者年齡、腫瘤大小、病理學類型以及ER、PR和HER-2表達無關(guān)（P＞0.05），但與腫瘤的臨床分期（Z=-2.214，P=0.027）和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)（Z=-2.754，P=0.006）。 結(jié)論外周血中檢出的hMAM mRNA表達是診斷乳腺癌相對特異性的標志，外周血中hMAM mRNA的表達可能與乳腺癌患者的預(yù)后相關(guān)。
目的探索人異黏蛋白（metaherin，MTDH）mRNA及其蛋白在乙肝相關(guān)性肝癌組織及其癌旁組織中的表達差異，并探索其臨床意義。 方法回顧性收集2012年7月至2013年10月期間湖北醫(yī)藥學院附屬太和醫(yī)院保存的乙肝相關(guān)性肝癌組織及其癌旁組織標本，采用熒光定量PCR法和Western blot法分別檢測乙肝相關(guān)性肝癌組織及其癌旁組織中MTDH mRNA及其蛋白的表達水平（均為10例），并采用免疫組化染色方法檢測72例乙肝相關(guān)性肝癌組織中MTDH蛋白的表達情況，進一步分析乙肝相關(guān)性肝癌組織中MTDH蛋白表達與患者臨床病理特征的關(guān)系。 結(jié)果乙肝相關(guān)性肝癌組織MTDH mRNA（8.50±0.84比4.55±0.81，t=10.797，P=0.000）及其蛋白（0.65±0.24比0.25±0.16，t=6.375，P=0.013）的表達水平均高于癌旁組織。在72例乙肝相關(guān)性肝癌組織中，42例MTDH蛋白呈陽性表達（58.3%），30例呈陰性表達（41.7%）。多因素logistic回歸模型結(jié)果顯示，在乙肝性相關(guān)性肝癌患者中，Edmondson分級為Ⅲ級（OR=4.783，95% CI：2.663～11.918，P=0.020）、有微血管浸潤（OR=37.790，95% CI：2.227～99.434，P=0.005）及有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（OR=7.332，95% CI：3.325～30.669，P=0.023）均與MTDH蛋白的陽性表達有關(guān)。 結(jié)論在乙肝相關(guān)性肝癌組織中存在MTDH mRNA及其蛋白的高表達，且MTDH蛋白的陽性表達與患者較差的預(yù)后相關(guān)。
目的探索雌激素受體α（ERα）陽性乳腺癌組織及乳腺纖維腺瘤組織中Mdm2的表達，并探索MDM2-siRNA對人乳腺癌MCF-7細胞增殖、克隆及凋亡的影響。 方法①回顧性收集筆者所在醫(yī)院2012年6月至2015年10月期間的經(jīng)病理組織學檢查確診的ERα陽性乳腺癌組織石蠟標本78例（乳腺癌組）及乳腺纖維腺瘤組織石蠟標本10例（乳腺纖維腺瘤組），采用免疫組化染色方法檢測其Mdm2的表達，并分析乳腺癌患者中Mdm2表達與其臨床病理特征的關(guān)系。②將MCF-7細胞分為MDM2-siRNA組、陰性對照組及空白對照組，MDM2-siRNA組和陰性對照組分別轉(zhuǎn)染MDM2-siRNA及無效干擾siRNA，空白對照組不加入任何試劑。檢測3組細胞中Mdm2的表達、細胞增殖率、克隆形成數(shù)量及凋亡率，并進行組間比較。 結(jié)果①乳腺纖維腺瘤組織中Mdm2均呈陰性表達，表達陽性率為0（0/10）；ERα陽性乳腺癌組織中Mdm2陽性表達38例，陽性表達率為48.7%（38/78），高于乳腺纖維腺瘤組織（χ2=12.357，P=0.000）；ERα陽性乳腺癌組織中Mdm2表達與患者的TNM分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)量均有關(guān)（P＜0.050），TNM分期越晚、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)量越多，Mdm2的表達陽性率越高。② MDM2-siRNA組細胞的Mdm2表達水平，轉(zhuǎn)染后2、3及4 d時的細胞增殖率及細胞克隆形成數(shù)均低于空白對照組和陰性對照組（P＜0.050），而細胞凋亡率高于空白對照組和陰性對照組（P＜0.050），但空白對照組和陰性對照組轉(zhuǎn)染后1、2、3及4 d時的細胞增殖率，Mdm2表達水平，細胞克隆形成數(shù)及細胞凋亡率比較差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.050）。 結(jié)論ERα陽性乳腺癌患者中Mdm2的表達情況是診斷乳腺癌的相對特異性標志物，靶向Mdm2可能在ERα陽性乳腺癌患者的治療中具有一定價值。
目的 采用 meta 分析的方法評價 DNA 甲基轉(zhuǎn)移酶 1（DNA methyltransferase 1，DNMT1）基因 rs16999593 位點的多態(tài)性與乳腺癌發(fā)病的關(guān)系。 方法 計算機檢索 PubMed、EMbase、Web of Science、中國知網(wǎng)、萬方、中國生物醫(yī)學文獻數(shù)據(jù)庫及維普數(shù)據(jù)庫中關(guān)于 DNMT1 基因多態(tài)性與乳腺癌發(fā)病關(guān)系的病例對照研究，檢索時間均為建庫至 2017 年 3 月。由兩位評價者按照納入和排除標準獨立篩選文獻，并對納入文獻進行方法學質(zhì)量評價。提取相關(guān)資料，采用 RevMan 5.3 軟件進行 meta 分析。 結(jié)果 最終納入 5 項病例對照研究，共計 1 741 例乳腺癌患者和 1 917 位健康對照者。meta 分析結(jié)果顯示：顯性遺傳模型 ［OR=0.63，95% CI 為（0.30，1.30），P=0.21］、純合子模型 ［OR=1.01，95% CI 為（0.70，1.47），P=0.95］、雜合子模型 ［OR=0.44，95% CI 為（0.18，1.04），P=0.06］ 及等位基因模型 ［OR=1.29，95% CI 為（0.90，1.86），P=0.16］ 均與乳腺癌的發(fā)生無關(guān)，但隱性遺傳模型 ［OR=1.74，95% CI 為（1.01，3.00），P=0.04］與乳腺癌的發(fā)生有關(guān)。 結(jié)論 在亞洲人群中，DNMT1 基因 rs16999593 位點的 TT 基因型是乳腺癌發(fā)病的保護因素。
目的檢測乳腺癌腫塊表面皮膚浸潤情況，從分子水平上探討乳腺癌腫塊表面皮膚乳腺癌細胞浸潤的特點，為乳腺癌手術(shù)方式、防治復發(fā)、乳腺重建等方面提供重要的臨床指導。 方法應(yīng)用巢式-逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)檢測人乳腺珠蛋白（hMAM）mRNA在15例乳腺增生組織及15例乳腺纖維腺瘤組織及相應(yīng)表面皮膚中的表達情況，同時檢測60例乳腺癌組織及乳腺癌患者腫瘤表面皮膚hMAM mRNA表達，并且分析其表達與年齡、腫瘤直徑、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤距乳頭中央距離、腫瘤分期的關(guān)系。 結(jié)果乳腺纖維腺瘤組織中hMAM mRNA表達陽性率為40.00%（6/15），乳腺增生組織中為53.33%（8/15），乳腺纖維腺瘤組織及乳腺增生組織表面皮膚均未檢出hMAM mRNA表達；60例乳腺癌組織中hMAM mRNA表達陽性率為83.33%（50/60），乳腺癌腫塊表面皮膚中檢查出3例(5.00%) hMAM mRNA表達陽性。乳腺癌組織中hMAM mRNA表達陽性率較乳腺纖維腺瘤組織及乳腺增生組織明顯增高（P＜0.05）。乳腺癌腫塊表面皮膚中hMAM mRNA表達與患者年齡、腫瘤直徑及腫瘤分期無關(guān)，但在腋窩淋巴結(jié)有轉(zhuǎn)移及腫瘤距乳頭中央距離＜4 cm患者的乳腺癌腫塊表面皮膚中hMAM mRNA表達陽性率明顯高于無腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤距乳頭中央距離≥4 cm者。 結(jié)論從本組有限的數(shù)據(jù)結(jié)果初步得出，在乳腺癌組織中hMAM mRNA高表達，hMAM mRNA在乳腺癌的皮膚浸潤診斷中可能具有一定的價值，在腋窩有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤距乳頭中央距離＜4 cm乳腺癌患者中容易發(fā)生腫瘤皮膚浸潤。
目的 探討乳腺癌組織中缺氧誘導因子-1α（HIF-1α）的表達及其與增殖細胞核抗原（PCNA）、微血管密度（MVD）及臨床病理因素的關(guān)系。方法 采用免疫組化SP法檢測乳腺纖維腺瘤、普通乳腺增生組織和乳腺癌組織中HIF-1α及PCNA蛋白的表達，用CD34單克隆抗體標記血管內(nèi)皮細胞并計數(shù)MVD。結(jié)果 HIF-1α蛋白在乳腺纖維腺瘤、普通乳腺增生組織中不表達； 在乳腺導管內(nèi)原位癌中表達陽性率為55.0%（11/20），浸潤性乳腺癌中為85.0%（51/60）； HIF-1α表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及雌激素受體狀態(tài)有關(guān)(P＜0.01)。乳腺癌中PCNA高表達率為75.0%（60/80），其中導管內(nèi)原位癌中為65.0%（13/20），浸潤性癌中為78.3%（47/60）。乳腺癌中HIF-1α表達與PCNA呈正相關(guān)（r=0.693，P＜0.01）,與導管內(nèi)原位癌中MVD亦呈正相關(guān)(r=0.682，P＜0.05)，與浸潤性癌中MVD無相關(guān)關(guān)系。結(jié)論 HIF-1α在乳腺癌組織中的表達明顯上調(diào)，與腫瘤細胞增殖、血管形成、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、雌激素受體狀態(tài)相關(guān)，提示HIF-1α對乳腺癌的腫瘤細胞增殖、血管形成、生長和侵襲、轉(zhuǎn)移起重要作用，有望成為腫瘤治療的新靶點。