目的 明確萎縮性骨不連組織中表達上調(diào)的數(shù)種微小RNA（micro RNA，miRNA）與其相應(yīng)靶基因mRNA、蛋白在hBMSCs 成骨分化過程中的表達變化趨勢和生物學功能。 方法 取自體髂骨植骨手術(shù)患者的髂骨骨髓血，采用密度梯度離心法分離培養(yǎng)hBMSCs。取第4 代hBMSCs 以成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液誘導(dǎo)成骨分化，分別提取0、12 h，1、2、4、7、14 d 時的細胞總RNA 和蛋白，進行miRNA 的實時定量PCR（quantitative real-time PCR，qRT-PCR）、相應(yīng)靶基因mRNA 的qRT-PCR 和蛋白Western blot 檢測。 結(jié)果 誘導(dǎo)hBMSCs 成骨分化時，成骨性靶基因堿性磷酸酶（alkaline phosphatase liver/bone/kidney，ALPL）、PDGF-α 多肽（PDGF-α polypeptide，PDGF-A）和BMP-2 的mRNA 和蛋白表達在多數(shù)時間點同對照（0 h）相比增加（BMP-2 在12 h 和1 d 時下降），1 ～ 7 d 變化最為顯著。不同時間點的miRNA、靶基因mRNA 和蛋白表達水平存在差異，其中hsa-miRNA-149 和hsa-miRNA-654-5p miRNA 含量的變化趨勢與各自靶基因ALPL 和BMP-2 的mRNA 及蛋白表達水平總體上成負相關(guān)（P lt; 0.05），hsa-miRNA-221 與其靶基因PDGF-A 的變化趨勢無明顯負相關(guān)關(guān)系（P gt; 0.05）。 結(jié)論 誘導(dǎo)hBMSCs 成骨分化過程中，hsa-miRNA-149 和hsa-miRNA-654-5p 對其相應(yīng)靶基因ALPL 和BMP-2 的mRNA 及蛋白存在密切調(diào)控關(guān)系。
目的探討微小RNA（microRNA,miRNA）在人脂肪來源干細胞（human adipose-derived stem cells,hADSCs）誘導(dǎo)成軟骨分化過程中的表達規(guī)律及其影響軟骨分化的可能機制。 方法取行抽脂術(shù)或其他腹部手術(shù)患者自愿捐贈的脂肪組織，分離、培養(yǎng)hADSCs并鑒定。取第3代細胞成軟骨分化，倒置相差顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，于誘導(dǎo)21 d行阿爾新藍染色觀察軟骨形成情況，誘導(dǎo)0、7、14、21 d行ELISA檢測成軟骨相關(guān)蛋白Ⅱ型膠原蛋白（collagen type Ⅱ,Col2a1）、蛋白聚糖（Aggrecan）、Col10a1以及硫酸軟骨素表達。采用基因芯片技術(shù)篩選hADSCs成軟骨誘導(dǎo)前及誘導(dǎo)后21 d差異性表達miRNA，并預(yù)測篩選出的miRNA靶基因。 結(jié)果實驗成功培養(yǎng)hADSCs，經(jīng)成軟骨誘導(dǎo)培養(yǎng)后，隨時間延長可形成軟骨球；21 d阿爾新藍染色呈陽性；hADSCs成軟骨誘導(dǎo)后7、14、21d，Col2a1、Aggrecan、Col10a1及硫酸軟骨素表達水平均較成軟骨誘導(dǎo)前hADSCs顯著增高，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。基因芯片技術(shù)共篩選出11個差異性表達miRNA，其中7個miRNA表達上調(diào)，4個miRNA表達下調(diào)。篩選出的成軟骨相關(guān)miRNAs預(yù)測靶基因可能參與了干細胞成軟骨分化、增殖、凋亡、細胞周期調(diào)控，以及介導(dǎo)細胞內(nèi)級聯(lián)反應(yīng)和自我更新等。 結(jié)論實驗篩選出11個成軟骨分化差異性表達超過2倍的miRNAs，并對其靶基因進行預(yù)測，加深了對hADSCs成軟骨分化機制的理解，為定向控制hADSCs成軟骨分化及篩選組織工程改良種子細胞提供了理論依據(jù)。
目的 從微小 RNA-203（microRNA-203，miR-203）的生成、組織分布以及其與腫瘤的關(guān)系方面對其做一綜述。 方法 通過查閱并篩選國內(nèi)外的相關(guān)文獻，歸納并總結(jié)有關(guān) miR-203 的生成、組織分布及其與腫瘤關(guān)系的最新研究情況。 結(jié)果 盡管目前有關(guān) miR-203 在惡性腫瘤中的作用的研究結(jié)果令人振奮，但是只有 miR-203 的少部分生物學功能得到了鑒定，與之相對應(yīng)的下游靶基因的調(diào)控機制亦尚未完全闡明。 結(jié)論 隨著相關(guān)研究的不斷深入，miR-203 有可能在腫瘤的分級、分類、診斷、治療及預(yù)后方面起到更加積極的作用。
微 RNA-92a（microRNA-92a, miR-92a）是在進化中高度保守的致病微 RNA，屬于微 RNA-17-92 基因簇成員，參與調(diào)控細胞增殖、凋亡及分化等生物學活動。最近研究發(fā)現(xiàn)，miR-92a 表達紊亂與疾病發(fā)生相關(guān)，主要通過調(diào)控靶基因或靶蛋白發(fā)揮致病作用。目前與 miR-92a 相關(guān)的研究主要集中在惡性腫瘤領(lǐng)域，且已發(fā)現(xiàn)其高表達與癌細胞惡性及腫瘤對放化療敏感性降低相關(guān)。miR-92a 靶向靶基因或靶蛋白致病及其與放化療的關(guān)系，是近年來的研究熱點?；诖耍撐膶?miR-92a 靶向靶基因或靶蛋白致病及其對化學治療影響的最新研究進行了綜述，以期對臨床疾病診療提供靶標。