干細胞為機體組織中的一個極小的未分化細胞亞群，具有增生、自我維持、自我更新、能產(chǎn)生大量具有功能的子代細胞。對胚胎干細胞、人成體視網(wǎng)膜干細胞及眼內(nèi)腫瘤干細\胞研究發(fā)現(xiàn)，人胚胎及成體視網(wǎng)膜均存在有干細胞，眼內(nèi)腫瘤如視網(wǎng)膜母細胞瘤、脈絡(luò)膜黑色素瘤內(nèi)也有腫瘤干細胞的存在；將不同干細胞移植到視網(wǎng)膜下或玻璃體腔，均能分化成神經(jīng)元或視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)。干細胞有望成為疾病發(fā)病機制及治療研究突破的最新靶點。 (中華眼底病雜志, 2007, 23: 83-86)
目的 分離及純化人眼脈絡(luò)膜黑色素瘤細胞OCM-1中的腫瘤干細胞。 方法 將OCM-1細胞復(fù)蘇，使用Dubecco標準改良Eagle培養(yǎng)基（DMEM/F12）培養(yǎng)后，改用無血清化學(xué)限定培養(yǎng)基（SFM），并分離純化培養(yǎng)腫瘤干細胞，用流式細胞儀檢測神經(jīng)干細胞特異性標記物CD133的表達比率,并對第六代細胞進行神經(jīng)RNA結(jié)合蛋白（musashi-1）免疫細胞化學(xué)染色，顯微鏡下觀察陽性細胞比率。 結(jié)果 在標準DMEM/F12培養(yǎng)基中貼壁生長的OCM1細胞用SFM培養(yǎng)基培養(yǎng)后，貼壁細胞顯著減少，至第6代時細胞均為懸浮團狀集落生長，呈現(xiàn)典型的干細胞生長方式。在不同代的細胞中，CD133均有陽性，未經(jīng)過分離的OCM-1細胞、經(jīng)過SFM培養(yǎng)并分離的第1、2代OCM1細胞的陽性比率分別2.5％、217％、57.8％，第6代的細胞CD133陽性比率達到79.8％，musashi-1強陽性表達。 結(jié)論 脈絡(luò)膜黑色素瘤細胞中存在腫瘤干細胞。使用干細胞培養(yǎng)液培養(yǎng)，并通過限制分化、連續(xù)傳代的方法，可分離純化出懸浮克隆集落生長的干細胞。 (中華眼底病雜志，2007， 23：87-90）
目的：探討視網(wǎng)膜前膜(epiretinal membranes，ERMs)和視網(wǎng)膜下膜(subretinal membranes，SRMs)內(nèi)淋巴細胞是否被激活及其免疫反應(yīng)的作用。 方法：用一組單克隆抗體mdash;抗CD25(激活T細胞)、抗CD23(激活B細胞)、抗CD68(巨噬細胞)和抗人類白細胞抗原Ⅱ類抗原(human leukocyte antigen Ⅱantigen，HLAmdash;DR)調(diào)查了增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變(prliferative vitreoretinopathy，PVR)、外傷性PVR和繼發(fā)性牽引性視網(wǎng)膜脫離的ERMs20例，PVR和外傷性PVR SRMs各1例。 結(jié)果：ERMsCD23和CD25陽性各4例，SRMsCD23和CD25陽性各l例。CD68和HLAmdash;DR在所有標本均為陽性。 結(jié)論：在ERMs和SRMs可能存在著T、B細胞介導(dǎo)的異常免疫反應(yīng)，這種反應(yīng)在上述疾病的發(fā)生發(fā)展中可能起著重要作用。 （中華眼底病雜志，1996，12：147-150）
目的 建立成年人與2個月月齡嬰兒視網(wǎng)膜組織的雙向凝膠電泳圖譜，初步分析成年人視網(wǎng)膜與嬰兒視網(wǎng)膜蛋白質(zhì)的表達差異。方法 9例角膜移植后剩余的成年人眼球視網(wǎng)膜組織，2 例角膜移植后剩余的2個月月齡嬰兒眼球視網(wǎng)膜組織；抽提蛋白質(zhì)，雙向凝膠電泳后考馬斯亮藍染色掃描分析圖譜，選取明顯差異蛋白點進行質(zhì)譜鑒定。結(jié)果 成年人與2個月月齡嬰兒視網(wǎng)膜組織的凝膠經(jīng)考馬斯亮藍染色分別檢測到1179和1295個蛋白點，其中1039個蛋白點位置相匹配。5個差異蛋白點的質(zhì)譜鑒定結(jié)果顯示，人血清白蛋白、鳥苷酸激酶在成年人的視網(wǎng)膜中高表達；微管蛋白、轉(zhuǎn)醛醇酶和晶體蛋白在2個月月齡嬰兒的視網(wǎng)膜中高表達。結(jié)論 成功建立了人視網(wǎng)膜蛋白質(zhì)的雙向凝膠表達圖譜。經(jīng)質(zhì)譜鑒定證實了成年人和嬰兒的視網(wǎng)膜蛋白質(zhì)存在表達差異。
目的 研究近視眼組織結(jié)構(gòu)改變，探索其發(fā)病機制。 方法 將雛雞單眼眼瞼縫合，驗光確定近視形成后，摘出眼球進行測量及光、電鏡檢查。 結(jié)果 縫合組眼球三條徑線均明顯增大，平均屈光度為-15.00D。光鏡下見縫合組視桿細胞外節(jié)較長，與視網(wǎng)膜色素上皮(retinal pigment epithelium, RPE)細胞胞體相接，用測微器測量鞏膜軟骨層增厚，視網(wǎng)膜變薄。電鏡下見縫合組視桿細胞外節(jié)變長，膜盤完整，RPE細胞胞質(zhì)內(nèi)含有外節(jié)磨盤片段的吞噬體明顯減少。 結(jié)論 早期形覺剝奪可影響雞視細胞外節(jié)磨盤脫落，并引起眼球增大，近視眼形成。 (中華眼底病雜志,1999,15:20-23)