目的 總結關節(jié)鏡技術在踝關節(jié)融合術中的應用。 方法 2005 年4 月－ 2009 年4 月，采用關節(jié)鏡下踝關節(jié)融合術治療12 例踝關節(jié)病變患者。男9 例，女3 例；年齡21 ～ 56 歲，平均38.6 歲。創(chuàng)傷性關節(jié)炎10 例，感染性關節(jié)炎2 例。左足4 例，右足8 例。病程5 個月～ 14 年。 結果 術后切口均Ⅰ期愈合。12 例均獲隨訪，隨訪時間14 ～ 36 個月，平均19 個月。術后患者行走恢復正常，踝關節(jié)無腫脹及明顯疼痛。術后3 ～ 7 個月X 線片示踝關節(jié)均骨性融合。 結論 關節(jié)鏡下行踝關節(jié)融合術具有微創(chuàng)的優(yōu)點，且術后關節(jié)融合率高。
目的探討 p38 絲裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase，MAPK）通路在 TGF-β1/結締組織生長因子（connective tissue growth factor，CTGF）調控人腰椎黃韌帶增生肥厚中的作用機制。方法取腰椎間盤突出髓核摘除術中獲得的黃韌帶組織，采用膠原酶預消化組織塊培養(yǎng)法分離培養(yǎng)黃韌帶細胞。分別用細胞外調節(jié)蛋白激酶通路阻斷劑 PD98059、c-Jun 氨基末端激酶通路阻斷劑 SP600125、p38 通路阻斷劑 SB203580 處理黃韌帶細胞，實時熒光定量PCR（real-time fluorescence quantitative PCR，qRT-PCR）檢測 CTGF、Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原 mRNA 相對表達量。然后取黃韌帶細胞分為 A、B、C、D 組，分別以小干擾 RNA（small interfering RNA，siRNA）、p38 siRNA、siRNA+3 ng/mL TGF-β1、p38 siRNA+3 ng/mL TGF-β1 轉染細胞，轉染 24 h 后行免疫熒光染色觀察 p38 和磷酸化 p38（phosphorylation p38，p-p38）表達，qRT-PCR 檢測各組 CTGF、Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原 mRNA 相對表達量，Western blot 檢測各組 CTGF 蛋白表達。結果p38 通路阻斷劑 SB203580 可明顯降低黃韌帶細胞 CTGF、Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原 mRNA 相對表達量（P<0.05）。轉染 24 h 后，免疫熒光染色顯示 A、C、D 組細胞呈陽性反應，有 p38、p-p38 表達，且 C、D 組強于 A 組；B 組細胞呈陰性反應，無 p38、p-p38 表達。與 A 組相比，B 組 CTGF、Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原 mRNA 相對表達量以及 CTGF 蛋白相對表達量顯著減少，C、D 組顯著增加，C 組較 D 組進一步增加，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結論p38 MAPK 通路介導 TGF-β1/CTGF 表達，在人腰椎黃韌帶細胞增生肥厚過程中具有重要作用。
目的探討 TGF-β1 誘導的黃韌帶細胞增生效應及其對結締組織生長因子（connective tissue growth factor，CTGF）表達的影響。方法取腰椎椎間盤突出髓核摘除術中的黃韌帶組織，采用膠原酶預消化組織塊培養(yǎng)法分離培養(yǎng)黃韌帶細胞。采用形態(tài)學觀察、免疫熒光染色觀察、MTT 法檢測細胞增殖情況進行細胞鑒定。取第 3 代黃韌帶細胞分為 5 組，A、B、C、D 組分別于細胞中加入 3 ng/mL TGF-β1、50 ng/mL CTGF、3 ng/mL TGF-β1+CTGF 中和抗體（1∶500）封閉、50 ng/mL CTGF+CTGF 中和抗體（1∶500）封閉，E 組加入無血清 DMEM 作為對照。采用 MTT 法檢測 TGF-β1 和 CTGF 對黃韌帶細胞增殖的影響，Western blot 檢測 CTGF 蛋白表達，實時熒光定量 PCR（real-time fluorescence quantitative PCR，qRT-PCR）檢測Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原、CTGF 基因表達。結果培養(yǎng)的黃韌帶細胞形態(tài)呈多樣性，均表現(xiàn)出典型的黃韌帶成纖維細胞表型；所有細胞均表達Ⅰ型膠原蛋白及波形蛋白，部分細胞表達Ⅲ型膠原蛋白；MTT 鑒定示隨培養(yǎng)時間延長，各代細胞吸光度（A）值均逐漸增加，同代細胞各時間點間 A 值比較差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05），相同時間點各代細胞間 A 值比較差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。培養(yǎng) 24 h MTT 法檢測示 A、B 組細胞 A 值顯著高于 E 組（P<0.05）；而加入 CTGF 中和抗體后，C、D 組 A 值降低，但仍高于 E 組（P<0.05）；A、C 組間及 B、D 組間比較差異亦有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。Western blot 檢測示 A、B 組 CTGF 蛋白相對表達量明顯高于 E 組（P<0.05）；而加入 CTGF 中和抗體后，C、D 組 CTGF 蛋白相對表達量顯著降低，但仍高于 E 組（P<0.05）；A、C 組間及 B、D 組間比較差異亦有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。qRT-PCR 檢測示，與 E 組比較，A 組 CTGF、Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原 mRNA 相對表達量均顯著增高（P<0.05）；加入 CTGF 中和抗體后，C 組各基因表達受到抑制，mRNA 相對表達量顯著低于 A 組，但仍顯著高于 E 組（P<0.05）。B 組Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原 mRNA 相對表達量顯著高于 E 組（P<0.05），但 CTGF mRNA 相對表達量與 E 組比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；加入 CTGF 中和抗體后，D 組Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原 mRNA 相對表達量受到抑制，低于 B 組，但仍顯著高于 E 組（P<0.05），CTGF mRNA 相對表達量與 B、E 組比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。結論TGF-β1 可促進黃韌帶細胞的 CTGF、Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原基因及蛋白表達水平增加，TGF-β1 通過 CTGF 協(xié)同促進黃韌帶細胞增生。