目的 研究堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)、轉化生長因子β1 (transforming growth factor β1，TGF-β1)、胰島素樣生長因子1(insulinlike growth factor 1，IGF-1)單獨或聯(lián)合作用于人胚半月板細胞，探討半月板組織工程種子細胞大量擴增最佳作用組合及濃度。方法 無菌條件下取健康婦女意外流產(chǎn)并自愿捐獻的4個月人胚半月板，體外分離、培養(yǎng)半月板纖維軟骨細胞，用Ⅱ型膠原免疫組織化學染色和Aggrecan免疫熒光染色檢測其性狀。取第3代細胞貼壁后使用血清饑餓法同步化細胞，加入IGF-1（1、10、50、100 μg/L）、TGF-β1(0.1、1.0、5.0、10.0、50.0 μg/L)、bFGF(5、10、50、100、200 μg/L)作用于半月板細胞,每樣本設8個復孔和陰性對照組，分別于作用后48 h和72 h采用MTT法檢測軟骨細胞增殖情況，以確定各生長因子最佳效應濃度。同法設7個組，每組8個復孔，分別為：陰性對照組、bFGF最佳效應濃度組(50 μg/L)、TGF-β1最佳效應濃度組(5 μg/L)、IGF-1最佳效應濃度組（50 μg/L）、bFGF 和TGF-β1最佳效應濃度聯(lián)用組、bFGF和IGF-1最佳效應濃度聯(lián)用組、TGF-β1和IGF-1最佳效應濃度聯(lián)用組，48 h和72 h用MTT比色法得出吸光度（A）值并分析軟骨細胞的增殖效應。結果 第3代半月板細胞擴增前后細胞均表達Ⅱ型膠原和Aggrecan蛋白。48 h和72 h 50 μg/L IGF-1，5 μg/L TGF-β1及50 μg/L bFGF濃度組與對照組相比均具有促細胞增殖作用，且差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；此即為各生長因子最佳效應濃度。生長因子聯(lián)用：bFGF 50 μg/L與IGF-1 50 μg/L聯(lián)用、IGF-150 μg/L與TGF-β1 5 μg/L聯(lián)用具有協(xié)同效應，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)； bFGF 50 μg/L與TGF-β1 5 μg/L聯(lián)用無協(xié)同效應，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。結論 bFGF、TGF-β1、IGF-1單獨使用均可體外擴增人胚半月板細胞，最佳效應濃度聯(lián)用時bFGF/IGF-1、IGF-1/TGF-β1的擴增效果優(yōu)于各自單獨使用，可用于體外大量擴增種子細胞。
目的 初步探討多種免疫抑制劑對嗜鉻細胞瘤12（pheochromocytoma 12，PC12）細胞和L929細胞增殖的影響。方法 對數(shù)生長期PC12細胞和L929細胞傳代，取細胞株復蘇后第3代細胞均以1×104/ml密度接種于培養(yǎng)板中，分別加入10-5 、10-6、10－7和10－8mol/L環(huán)孢菌素A（cyclosporin A,CsA），10－6 、10－7 、10－8和10－9mol/L FK506以及10－3、10－4 、10－6 和10－8 mol/L甲基強地松龍，并設立空白對照組。于培養(yǎng)24、48和72 h后，取各濃度藥物作用的細胞，采用MTT法檢測細胞增殖。結果 高濃度（10-3mol/L）甲基強地松龍和較低濃度（10－8～10－7mol/L）CsA，在給藥后48 h內(nèi)對PC12細胞增殖有明顯促進作用，此后促增殖作用不明顯；而各個濃度的FK506均無促進PC12細胞增殖的作用。高濃度甲基強地松龍（10-3mol/L）和CsA（10-6～10-5 mol/L）作用24 h后，對L929細胞增殖有顯著抑制作用，F(xiàn)K506僅在較高濃度（10-6 mol/L）有一過性（僅出現(xiàn)于給藥后48 h）促進L929細胞增殖的作用。結論 10-3mol/L甲基強地松龍和10-8～10-7mol/L CsA能夠在短時間內(nèi)促進PC12細胞增殖，而10-3 mol/L甲基強地松龍和10-6～10-5 mol/L CsA對L929細胞增殖有顯著抑制作用。