癲癇患者的精神障礙患病率高于普通人群。目前尚無診斷標準，其診斷需要結合國際抗癲癇聯(lián)盟推薦的癲癇診斷標準和精神疾病診斷與統(tǒng)計手冊。癲癇患者出現(xiàn)精神障礙，根據(jù)精神障礙與癲癇的關系，可以分為以下三種類型：癲癇合并精神分裂癥、癲癇特有的精神障礙以及抗癲癇藥物誘發(fā)精神障礙。三種類別的精神障礙臨床表現(xiàn)、病程、治療原則以及預后均各有迥異，需要在臨床診治過程中進行鑒別。但是至今相關的研究報道仍然不多，相關的臨床問題尚未引起注意得到關注，期待更多的臨床研究，提供更多的循證醫(yī)學證據(jù)。
目的通過生物信息學方法分析顳葉內(nèi)側癲癇（Mesio-temporal lobe epilepsy，MTLE）模型小鼠的海馬組織與正常海馬組織差異表達的基因，以及其生物學功能、細胞定位、參與的信號通路等，篩選出在 MTLE 發(fā)生發(fā)展過程中的關鍵基因，并挑選關鍵基因中處于整個調(diào)控網(wǎng)絡的核心基因（與其它基因關系最密切者），為 MTLE 的發(fā)病機制及其防治研究提供新思路。方法① 從基因芯片公共數(shù)據(jù)庫（Gene expression omnibus，GEO）中搜索下載 MTLE 相關基因芯片數(shù)據(jù)集（GSE88992），該芯片含有 17 個癲癇模型小鼠的海馬標本［包括 8 個病例組和 9 個對照組，其中將通過注射海藻氨酸（Kainic acid，KA；1 nmol/50 nL）獲得的 MTLE 小鼠模型作為病例組，注射生理鹽水的小鼠作為平行對照組，在注射后 6、12 及 24 h 提取海馬標本］；② 通過 GEO2R 工具篩選和鑒定出 MTLE 小鼠的差異表達基因（Differentially expressed genes，DEGs），調(diào)整后 P 值<0.05，|log2（fold-change）|>1 作為截斷值的標準；③ 使用 Venny2.1.0 對上調(diào)和下調(diào)的差異表達基因分別取交集，篩選出共同差異表達的基因；④ 利用 DAVID 在線網(wǎng)站及 FUNRICH 軟件分析基因的信號通路、基因蛋白表達等信息；⑤ 利用 STRING 在線網(wǎng)站及 Cytoscape 軟件分析差異基因表達蛋白的相互作用以及挑選出 5 個與周圍基因高度相關性（度值，Degree）的中樞基因，實現(xiàn)蛋白相互作用的可視化及分析核心模塊基因。結果① 在 GEO 數(shù)據(jù)集 GSE88992，注射后 6、12 和 24 h 的結果中篩選出 688、1 294 和 1 916 個 DEGs，分別包括 549、797 和 870 個上調(diào)基因以及 139、497 和 1 046 個下調(diào)基因；② 所有 DEGs 中，有 285 個上調(diào)的 DEGs 和 46 個下調(diào)的 DEGs，共有 331 個 DEGs 在 3 個結果中共存，提示這 331 個共表達 DEGs 具有重要意義；③ 篩選出 DEGs 中的核心模塊以及挑選出 10 個核心基因（Il6、Fos、Stat3、Ptgs2、Ccl2、Timp1、Cd44、Icam1、Atf3、Cxcl1），生物信息學分析提示核心模塊基因主要富集在細胞質膜與細胞間隙中；涉及的生物學過程集中在中性粒細胞趨化、炎癥反應、正向調(diào)控 ERK1 和 ERK2 級聯(lián)反應；生物分子功能集中在趨化因子活性、細胞因子活性和趨化因子受體結合等；KEGG 信號通路分析 DEGs 主要參與趨化因子信號通路、細胞因子互作信號通路等信號通路。結論通過生物信息學分析表明 MTLE 的發(fā)病機制錯綜復雜，是多個基因相互作用的結果，多條信號通路參與了 MTLE 的發(fā)病，對 MTLE 基因表達的進一步分析有利于揭示其發(fā)病機制以及確定新的候選治療靶點。
目的回顧性總結并分析抗癲癇藥物(AEDs)治療3年無發(fā)作癲癇患者逐漸減藥及停藥后復發(fā)的相關危險因素 方法選取中山大學附屬第一醫(yī)院癲癇?？崎T診隨診的癲癇患者, AEDs治療至少3年無發(fā)作; 在減藥過程中或者停藥的患者, 每2個月隨診一次。入組標準:①確診為癲癇, 定義為間隔24 h以上的至少2次無明顯誘發(fā)因素的癲癇發(fā)作; ②在穩(wěn)定的AEDs治療下, 連續(xù)3年達到完全無發(fā)作; ③有減藥的意愿, 并能夠按時回訪; ④腦電圖(EEG)沒有尖波、棘波、尖慢和棘慢復合波等癲癇波發(fā)放。癲癇復發(fā)及相關危險因素采用生存分析, 包括:性別、起病年齡、癲癇發(fā)作次數(shù)、減藥前癲癇無發(fā)作的時間、減藥時間、減藥后無發(fā)作時間(復發(fā)時間)、顱腦磁共振成像結果、癲癇控制前后EEG表現(xiàn)、發(fā)作類型(根據(jù)病史、長程視頻腦電圖分為全面性、部分性和多種發(fā)作形式)、病情穩(wěn)定時AEDs的數(shù)量。Log-rank檢驗用于獨立因素分析, Cox比例風險回歸模型用于多因素回歸分析。 結果共收集68例癲癇患者, 其中男39例, 女29例; 復發(fā)率為23.5%。單因素分析和多重回歸分析提示:多藥治療, 海馬硬化和減藥時間與癲癇復發(fā)相關, 為獨立的危險因素, 其風險系數(shù)為:0.861、2.223和2.137。 結論研究中復發(fā)率與其他報道一致。多藥、海馬硬化和減藥時間, 這3個危險因素在決定減藥時需慎重考慮。因此推薦3年完全無發(fā)作的癲癇患者可以考慮減藥, 但如有海馬硬化、多藥治療需慎重啟動停藥計劃。
目的應用Sequenom iPEX體系分析超極化激活環(huán)核苷酸門控通道（Hyperpolarization-activated cyclic nucleotide gated channel，HCN）基因多態(tài)性位點與內(nèi)側顳葉癲癇遺傳易感性相關性。 方法研究對象為2013年12月-2016年4月就診于中山大學附屬第一醫(yī)院癲癇門診診斷為內(nèi)側顳葉癲癇患者共143例，同期納入120名醫(yī)院體檢中心年度體檢的健康人群為對照組。入組標準為ILAE 2004年診斷依據(jù)：①患者年齡12~55歲；②部分性發(fā)作或者繼發(fā)強直-陣攣發(fā)作，有典型的顳葉起源的癥狀，如胃氣上升感、似曾相識感、口咽部和手部自動癥；③伴或不伴有中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染史和熱性驚厥病史；④腦電圖提示單側或雙側顳區(qū)尖波、尖慢、棘慢等癲癇樣波；⑤頭顱MRI提示海馬硬化。排除標準為：①腫瘤；②MRI提示局部皮質發(fā)育不良。對上述研究對象提取外周血基因組DNA，使用Sequenom iPEX體系進行HCN基因SNP位點檢測HCN1和HCN2共10個多態(tài)性位點。采用SPSS 16.0進行統(tǒng)計分析。 結果所選HCN1和HCN2 10個SNP位點均滿足Hardy-Weinberg遺傳平衡定律。HCN1多肽性位點rs17344896 C/T，rs6451973A/G和HCN2多態(tài)性位點rs12977194A/G差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。 結論HCN1多態(tài)性位點rs17344896 C/T，rs6451973A/G和HCN2多態(tài)性位點rs12977194A/G與內(nèi)側顳葉癲癇遺傳易感性相關。
目的 驗證鋰-匹羅卡品化學誘導及抗癲癇藥物（AEDs）篩選構建的苯妥英鈉耐藥性顳葉內(nèi)側癲癇大鼠模型腦中 AEDs 濃度及多藥轉運蛋白表達。 方法 實驗選取雌性 6～8 周 SD 大鼠 30 只，體重 160～180 g（廣東省實驗動物研究所），采用鋰-匹羅卡品化學誘導大鼠發(fā)生慢性顳葉內(nèi)側癲癇，視頻腦電圖（VEEG）監(jiān)測苯妥英鈉篩選期治療效果，將顳葉內(nèi)側癲癇大鼠分成耐藥性及不耐藥性模型。采用活體微透析技術驗證耐藥性及不耐藥性模型鼠腦中 AEDs 的濃度差異，免疫組織化學方法檢測兩組模型鼠腦中 P 糖蛋白的表達。 結果 有 16 只大鼠成功構建為慢性顳葉內(nèi)側癲癇模型，篩選出耐藥模型大鼠 6 只（6/16）。苯妥英鈉耐藥性模型大鼠腦/血漿的時間藥物濃度曲線的曲線下面積比值顯著低于不耐藥性模型大鼠（0.15±0.03 vs. 0.28±0.05，P<0.05）。苯妥英鈉耐藥性模型鼠較不耐藥性模型鼠海馬各區(qū) P 糖蛋白表達明顯增高（P<0.05）。 結論 苯妥英鈉耐藥性顳葉內(nèi)側癲癇大鼠腦中 AEDs 濃度低，可能與腦中 P 糖蛋白過表達有關。
目的觀察添加 P-糖蛋白抑制劑維拉帕米（Verapamil, VPM）對抗癲癇藥物苯妥英鈉（Phenytoin, PHT）在慢性顳葉內(nèi)側癲癇（Mesial temporal lobe epilepsy, MTLE）大鼠模型體內(nèi)濃度分布的影響。方法鋰-匹羅卡品誘導構建 MTLE 大鼠模型，分成兩組，分別予 PHT（n=6）及 PHT+VPM（n=9）治療，比較兩組大鼠血、腦、肝、腎中 PHT 濃度分布情況?；铙w微透析采集腦微透析液檢測病灶中藥物濃度，高效液相色譜法檢測 PHT 濃度。運用 t 檢驗（或 Wilcoxon 秩和檢驗）方法進行統(tǒng)計分析。結果添加 VPM 治療的 9 只模型大鼠中 4 只在給藥后 30 min 內(nèi)死亡，有效入組 5 只。添加 VPM 治療的模型大鼠的腦/血 PHT 時間藥物濃度曲線的曲線下面積（Area under the curve, AUC）比值降低，差異具有統(tǒng)計學意義［PHT 組（0.21±0.02）>VPM+PHT 組（0.11±0.06），t=3.237，P=0.025］，而肝/血［PHT 組（1.12±0.37） vs. VPM+PHT 組（0.99±0.27），Z=?0.490，P=0.624］及腎/血［PHT 組（0.74±0.16）vs. VPM+PHT 組（0.49±0.26），t=1.872，P=0.103］的 PHT 藥物濃度比值差異無統(tǒng)計學意義。結論P-糖蛋白抑制劑 VPM 會顯著降低 PHT 在 MTLE 模型大鼠腦中的分布。
超極化激活環(huán)核苷酸門控通道（Hyperpolarizationactivated cyclic nucleotide gatedchannel，HCN）屬于電壓門控型離子通道，迄今為止發(fā)現(xiàn)有四個亞型：HCN1～HCN4。HCN 通道的激活依賴于膜的超級化，在膜電位低于靜息電位時，HCN 通道被激活，產(chǎn)生局部緊張性電流，導致持續(xù)的鈉內(nèi)流，使細胞膜發(fā)生去極化。該通道分布在人體的分布并不一致，主要在神經(jīng)系統(tǒng)和心臟中表達。目前研究表明，HCN 通道既參與所在組織的正常生理功能，如睡眠和覺醒、學習和記憶、視覺和疼痛感知、神經(jīng)元起搏、樹突整合等，也與多種中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病及所在組織的病理狀態(tài)密切相關，如神經(jīng)病理性疼痛、學習記憶障礙、藥物成癮和顳葉癲癇，特別是在伴海馬硬化性內(nèi)側顳葉癲癇中。癲癇作為神經(jīng)系統(tǒng)最常見的神經(jīng)疾病之一，癲癇因其病因錯綜復雜，病理改變亦多樣性，至今尚未能完全了解其全部發(fā)病機制。目前有大量的文獻報道 HCN 與癲癇，特別是顳葉癲癇的發(fā)生發(fā)展有密切關系。因此本文就 HCN 通道的結構特征、分布、功能、調(diào)控及其在顳葉癲癇發(fā)生過程中的新研究進展進行綜述。
目的通過生物信息學預測分析人超極化激活環(huán)核苷酸門控通道1（Hyperpolarization activated cyclic nucleotide gated channel 1，HCN1）基因的啟動子區(qū)的序列特征、轉錄因子及其結合位點和蛋白質的理化性質、信號肽、親疏水性、跨膜區(qū)域、蛋白結構、與之相互作用的蛋白質及功能，為研究 HCN1 基因的表達調(diào)控及其參與伴海馬硬化內(nèi)側顳葉癲癇等相關疾病的發(fā)病機制奠定理論基礎。方法通過 Protparam、Protscale、TMHMM、SignalP 5.0、NetPhos 3.1、Swiss-Model、Promoter 2.0、AliBaba2.1 和 EMBOSS 等生物軟件和網(wǎng)站分析和預測人 HCN1 蛋白理化性質、結構功能、定位表達、系統(tǒng)進化關系、蛋白相互作用以及 HCN1 基因啟動子、CpG 島及轉錄因子結合位點特征等。結果信息學的預測 HCN1 蛋白的進化分析表明，人與黑猩猩的遺傳距離最小，親緣關系最近。人 HCN1 蛋白是位于質膜上不穩(wěn)定的親水性蛋白，存在 2 個典型的跨膜螺旋區(qū)，預測該蛋白無信號肽及核定位序列。HCN1 蛋白的二級結構主要為無規(guī)則卷曲及 α-螺旋，且含有多個潛在的磷酸化位點。HCN1 的本體論分析：細胞組成分析表明 HCN1 蛋白位于質膜 (GO:0005886)；分子功能表現(xiàn)為與環(huán)磷酸腺苷（cyclic Adenosine monophosphate, cAMP）結合（GO:0030552）和電壓門控離子通道活性（GO:0005244），參與細胞對 cAMP 的反應過程（GO:0071320）和鉀離子的跨膜運輸（GO:0071805）。與人 HCN1 存在相互作用的 10 個蛋白，包括 HCN2、HCN4、PEX5L、MARCH7、KCTD3、GNAT3、SHKBP1、KCNQ2、FLNA 和 NEDD4L。主要為參與離子跨膜轉運的調(diào)節(jié)（GO:0034765）和鉀離子的跨膜運輸（GO:0071805）。HCN1 基因定位于 5p12，含有 8 個外顯子和 7 個內(nèi)含子。HCN1 基因上游至 5'側翼共 2 000 bp 的核苷酸序列存在 3 個啟動子區(qū)。啟動子區(qū)序列中存在 1 個長度為 158 bp 的 CpG 島，HCN1 基因 5'調(diào)控區(qū)存在 1 個 CAAT 盒及 1 個 TATA 盒。被兩種軟件同時預測到的 HCN1 基因啟動子區(qū)的轉錄因子結合位點有 19 種，包括 NF-κB、NF-1、AP-1、TBP、IRF-1、c-Ets-1、Elf-1、HNF-3、HNF-1、YY1、GATA-1、RXR-α、GR、AP-2αA、ENKTF-1、C/EBPβ 、C/EBPα、c-Fos 和 c-Jun。結論分析結果為進一步研究 HCN1 在癲癇發(fā)生發(fā)展過程中的作用具有重要意義，啟動子區(qū)的生物信息學分析能夠提高基因啟動子的研究效率，為后續(xù)實驗構建 HCN1 基因啟動子表達載體及鑒定啟動子功能提供理論依據(jù)。
DNA 甲基化是人類發(fā)現(xiàn)最早的表觀遺傳學修飾之一，具有多種調(diào)控功能，參與機體發(fā)育過程中干細胞生長、細胞增殖、器官發(fā)育、衰老和腫瘤發(fā)生等多個生物學過程，而且在突觸重塑、神經(jīng)細胞分化等神經(jīng)生物過程中也具有重要作用。近年來，越來越多的研究表明 DNA 甲基化修飾與癲癇的發(fā)病機制密切相關，特別是基因啟動子的甲基化改變逐漸受到關注。文章主要對表觀遺傳中基因啟動子區(qū)的甲基化在癲癇發(fā)生發(fā)展中的研究進展進行綜述。
目的回顧性分析丙戊酸鈉（VPA）聯(lián)合應用拉莫三嗪（LTG）對癲癇患者血氨的影響，評價癲癇患者血氨升高的影響因素。方法選取 2018 年 5 月—2020 年 4 月于中山大學附屬第七醫(yī)院就診的 146 例癲癇患者（包括新診斷癲癇患者），收集患者相關的臨床資料，將其分為未使用抗癲癇藥物組（A 組）、單用 VPA 組（B 組）和 VPA 聯(lián)用 LTG 組（C 組），比較患者的血氨指標。結果A 組、B 組和 C 組的平均血氨水平分別為 （18.14±1.19）、（25.89±0.87） 和 （36.60±4.34） μmol/L，血氨高于正常值的發(fā)生率分別為 2.77%、8.89% 和 20.0%。B 組與 A 組及 C 組的差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05），C 組與 A 組的差異具有統(tǒng)計學意義（P 均<0.05）。結論癲癇患者使用 VPA 會有血氨增加的風險，在接受 VPA 治療的患者中，同時使用 LTG 可能會有進一步增加血氨的風險。血氨的增加可能由多種因素引起，在臨床上 VPA 與 LTG 聯(lián)合用藥時，應注意監(jiān)測患者的血氨濃度，避免臨床出現(xiàn)高氨血癥狀的出現(xiàn)。