目的 探討T細(xì)胞共刺激分子及其亞群在胃癌、大腸癌發(fā)生及預(yù)后中的作用.方法 應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測38例胃癌、42例大腸癌患者和21例健康人(對照組)外周血T細(xì)胞亞群及其共刺激分子CD28的表達(dá).結(jié)果 T細(xì)胞共刺激分子CD28(CD28+CD3+)表達(dá): 胃癌組為(25.80±10.56)%,大腸癌組為(28.95±9.29)%,均明顯高于對照組的(0.82±0.98)%,P＜0.01; 總T細(xì)胞(CD3+)表達(dá): 胃癌組為(53.61±13.84)%,大腸癌組為(55.96±10.68)%,均明顯低于對照組的(72.07±7.83)%,P＜0.01; CD4+ T細(xì)胞(CD4+CD3+)表達(dá): 胃癌組為(29.84±9.71)%,大腸癌組為(33.75±9.04)%,也均明顯低于對照組的(38.79±5.08)%,P＜0.01, P＜0.05; 細(xì)胞毒T細(xì)胞(CTL,CD8+CD28+CD3+)表達(dá): 胃癌組為(1.57±1.99)%,大腸癌組為(1.93±2.61)%,均明顯高于對照組的(0.02±0.04)%,P＜0.01; 胃癌組CD8+抑制性T細(xì)胞(CD8+CD28-CD3+)和CD4/CD8比值明顯低于對照組[(16.06±6.94)% vs (20.56±6.54)%,P＜0.05; (1.10±0.51)% vs (1.36±0.31)%,P＜0.05]; 大腸癌組調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(CD4+CD25+CD3+)明顯高于對照組[(19.74±6.89)% vs (13.72±3.08)%, P＜0.01].胃癌組和大腸癌組患者手術(shù)前和手術(shù)后1周外周血T細(xì)胞亞群(除外胃癌組的CD3+細(xì)胞和CD28+CD3-細(xì)胞)的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05). 結(jié)論胃癌和大腸癌患者T細(xì)胞數(shù)量明顯減少,T細(xì)胞共刺激分子CD28表達(dá)增高.胃癌患者CD4+T細(xì)胞顯著減少; 大腸癌患者調(diào)節(jié)性T細(xì)胞顯著增加.
目的 探討在非接觸性共培養(yǎng)環(huán)境下，BMSCs定向分化為類髓核細(xì)胞在共培養(yǎng)時(shí)間上的差異性，尋找適合體內(nèi)移植的最佳時(shí)間。 方法取6只8周齡健康新西蘭大白兔（體重1.5～2.0 kg）骨髓及椎間盤髓核，分離、培養(yǎng)BMSCs和髓核細(xì)胞并進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定。取原代髓核細(xì)胞和第2代生長良好的BMSCs體外建立非接觸性共培養(yǎng)模型。觀察共培養(yǎng)后第1、3、5代BMSCs的形態(tài)學(xué)變化并繪制生長曲線；RT-PCR檢測共培養(yǎng)5、10、15 d BMSCsⅡ型膠原和蛋白聚糖mRNA表達(dá)；Western blot檢測共培養(yǎng)5、10、15、20、25、30 d BMSCs Ⅱ型膠原和蛋白聚糖蛋白的表達(dá)。 結(jié)果BMSCs相對特異性標(biāo)記物CD44、CD90表達(dá)陽性，造血細(xì)胞表面標(biāo)記物CD34、CD45表達(dá)陰性。髓核細(xì)胞Ⅱ型膠原、蛋白聚糖表達(dá)陽性。共培養(yǎng)后2周BMSCs形態(tài)發(fā)生明顯變化，呈多角形、不規(guī)則形；共培養(yǎng)后3代內(nèi)，BMSCs生長速度無明顯差異，隨著傳代次數(shù)增加，細(xì)胞增殖明顯減慢。RT-PCR檢測示共培養(yǎng)后10、15 d BMSCs蛋白聚糖和Ⅱ型膠原mRNA表達(dá)明顯高于5 d時(shí)（P lt; 0.05），而10 d與15 d時(shí)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。Western blot檢測示共培養(yǎng)后隨時(shí)間延長細(xì)胞表達(dá)Ⅱ型膠原和蛋白聚糖蛋白逐漸增加，5、10、15 d間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05），15 d后各時(shí)間點(diǎn)間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。 結(jié)論在非接觸性共培養(yǎng)環(huán)境下，BMSCs在髓核細(xì)胞誘導(dǎo)下可向類髓核細(xì)胞分化，表達(dá)Ⅱ型膠原和蛋白聚糖，在共培養(yǎng)15 d時(shí)達(dá)到相對穩(wěn)定，此時(shí)較適合進(jìn)行體內(nèi)移植。