• 上海市第一人民醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室 200080;

目的 建立胚胎及成人視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞體外培養(yǎng)系統(tǒng),為視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞的基礎(chǔ)研究與藥物開(kāi)發(fā)提供實(shí)驗(yàn)?zāi)P汀? 方法 10~13周齡胎兒及20~40歲成人視網(wǎng)膜神經(jīng)層用不同的酶進(jìn)行消化,分散的細(xì)胞接種于預(yù)先經(jīng)過(guò)包被的細(xì)胞培養(yǎng)盤(pán)內(nèi),加入或不加入表皮生長(zhǎng)因子(epidermal growth factor, EGF)、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(fibroblast growth factor, FGF)、腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(brainderived neurotrophic factor, BDNF)、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素4(neurotrophic-4,NT-4)等培養(yǎng)。通過(guò)BrdU摻入、免疫組織化學(xué)及免疫熒光等方法檢測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞增殖并辨別細(xì)胞成分。 結(jié)果 胚胎及成人視網(wǎng)膜細(xì)胞可在體外連續(xù)培養(yǎng)100及180 d以上。加入EGF、FGF、BDNF或NT-4可明顯促進(jìn)胚胎與成人視網(wǎng)膜神經(jīng)元存活,胎兒視網(wǎng)膜細(xì)胞增殖。與對(duì)照組相比,處理組神經(jīng)元或神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的百分率較高。 結(jié)論 胚胎及成人視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)為視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞基礎(chǔ)研究及藥物開(kāi)發(fā)提供了一種十分有價(jià)值的手段,加入外源性的生長(zhǎng)因子可促進(jìn)培養(yǎng)的視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞存活、增殖與分化。 (中華眼底病雜志, 2002, 18: 279-282)

引用本文: 劉文文,徐萍,黃倩. 胚胎與成人視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng). 中華眼底病雜志, 2002, 18(4): 279-282. doi: 復(fù)制

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