目的 探討表皮生長因子(epidermal growth factor,EGF)、成纖維細(xì)胞生長因子(fibroblast growth factor,FGF)及胎牛血清對體外培養(yǎng)的人胚胎視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞 生長、增殖、分化和凋亡等的影響及可能的機(jī)制。 方法 采用胎牛血清培養(yǎng)人胚胎視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞,加入或不加入EGF、FGF。通過神經(jīng)元特異稀醇化酶(neuron specific enolase, NSE)、視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞特異的Thy1.1抗體、膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)免疫組織化學(xué)染色、倒置顯微鏡及掃描電鏡觀察鑒定細(xì)胞成分;細(xì)胞生長曲線及溴脫氧尿苷(bromodeoxyuridine, BrdU)摻入測定細(xì)胞增殖率;原位末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的脫氧尿苷三磷酸切口末端標(biāo)記(Tdt-mediated dUTP nick end labelling, TUN EL)檢測細(xì)胞凋亡;c-fos、c-jun及bcl-2、bax免疫組織化學(xué)染色判斷轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子及細(xì)胞凋亡調(diào)控因子表達(dá)水平,計數(shù)陽性細(xì)胞并進(jìn)一步作統(tǒng)計分析。 結(jié)果 經(jīng)過EGF、FGF培養(yǎng)的人胚胎視網(wǎng)膜細(xì)胞總數(shù)增加,細(xì)胞倍增時間縮短,BrdU摻入率增加,凋亡細(xì)胞數(shù)減少,其 中NSE、Thy1.1陽性細(xì)胞數(shù)明顯增加。同時,c-fos、c-jun及bcl-2陽性細(xì)胞數(shù)也增加。 結(jié)論 生長因子EGF、FGF可通過上調(diào)轉(zhuǎn)錄因子c-fos、c-jun及細(xì)胞凋亡抑制因子bcl-2表達(dá)促進(jìn)體外培養(yǎng)的人胚胎視網(wǎng)膜細(xì)胞存活與增殖。 (中華眼底病雜志,2003,19:113-116)

引用本文: 劉文文,徐萍,陳霞芳,黃倩. 生長因子對培養(yǎng)的胚胎視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞增殖與凋亡的影響. 中華眼底病雜志, 2003, 19(2): 113-116. doi: 復(fù)制

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