目的 觀察細(xì)胞內(nèi)Ca2+及MERTK基因在人視網(wǎng)膜色素上皮（RPE）細(xì)胞的吞噬功能中所起的作用及二者的相互關(guān)系。方法 用視細(xì)胞外節(jié)膜盤（ROS）于37℃孵育培養(yǎng)的RPE細(xì)胞，在孵育不同終止吞噬反應(yīng)。雙重?zé)晒鈽?biāo)記法檢測(cè) RPE細(xì)胞吞噬動(dòng)力學(xué)；鈣離子熒光探針負(fù)載法在熒光顯微鏡下測(cè)定RPE細(xì)胞內(nèi)Ca2+的變化；半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RTPCR）法檢測(cè)相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)MERTK 基因表達(dá)的變化及施加Ca2+激活劑（A23187載體）或拮抗劑（verapamile）后MERTK 基因表達(dá)的變化。結(jié)果 RPE細(xì)胞與ROS孵育過(guò)程中，ROS結(jié)合于RPE細(xì)胞表面發(fā)生在15 min時(shí)，RPE細(xì)胞吞噬ROS在24 h時(shí)達(dá)到飽和。細(xì)胞內(nèi)Ca2+在孵育15 min 時(shí)升高，并在24 h內(nèi)保持高水平；MERTK 基因表達(dá)在RPE細(xì)胞與ROS孵育5 min時(shí)增強(qiáng)，并在全部孵育過(guò)程中呈現(xiàn)出高表達(dá)狀態(tài)；以A23187載體開放鈣通道升高RPE細(xì)胞內(nèi)Ca2+后，MERTK 基因信使核糖核酸（mRNA）水平升高，并呈劑量依賴性。經(jīng)A23187預(yù)處理后的孵育實(shí)驗(yàn)中所檢測(cè)到的MERTK mRNA水平除3 h 這一時(shí)間點(diǎn)外均高于對(duì)照組； verapamile拮抗RPE細(xì)胞內(nèi)Ca2+后，MERTK 基因表達(dá)明顯下降并呈劑量依賴性；以verapamile預(yù)處理后繼續(xù)與ROS孵育，所檢測(cè)到的MERTK基因在24 h內(nèi)均低于對(duì)照組。結(jié)論 MERTK基因及細(xì)胞內(nèi)Ca2+發(fā)揮著維持RPE細(xì)胞吞噬過(guò)程的重要作用，MERTK作為上游調(diào)控信號(hào)啟動(dòng)下游的細(xì)胞內(nèi)Ca2+信號(hào)來(lái)維持RPE細(xì)胞對(duì)ROS的攝入過(guò)程。
引用本文： 孫昱昭,洪晶,安剛. 細(xì)胞內(nèi)Ca2+及MERTK基因在人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞吞噬功能中的作用. 中華眼底病雜志, 2009, 25(3): 193-197. doi: 復(fù)制
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