目的 探討兔口腔黏膜細胞的體外培養(yǎng)方法，并以其為種子細胞與異體膀胱黏膜下脫細胞基質（bladder acellular matrix graft，BAMG）復合，構建組織工程尿道。 方法 18 只10 周齡雄性新西蘭大耳白兔，體重0.3 ～ 0.5 kg。取其中12 只兔口腔黏膜組織，分離獲得口腔黏膜細胞。將口腔黏膜細胞分別接種于有3T3 細胞及無3T3細胞的培養(yǎng)皿進行培養(yǎng)，接種后第2 天于倒置相差顯微鏡下觀察細胞形態(tài)變化，繪制細胞生長曲線，觀察生長增殖情況，并行免疫熒光組織化學染色鑒定。取余6 只兔膀胱，經脫細胞處理制備BAMG，隨機取1 cm × 1 cm 組織行HE 染色，觀察脫細胞效果。將接種于有3T3 細胞培養(yǎng)皿培養(yǎng)獲得的第2 代口腔黏膜細胞種植于BAMG 上，培養(yǎng)1 周后，行HE 染色及掃描電鏡觀察口腔黏膜細胞與BAMG 的復合狀況。 結果 倒置相差顯微鏡下觀察，接種于有3T3 細胞培養(yǎng)皿的口腔黏膜細胞可傳至7 ～ 8 代，其細胞形態(tài)均一，功能良好；無3T3 細胞培養(yǎng)皿的口腔黏膜細胞形態(tài)多樣，傳至第2 代時，即開始出現老化。細胞生長曲線顯示，兩種方法培養(yǎng)的口腔黏膜細胞均于第8 天開始呈對數增長，第14 天達峰值。接種于有3T3 細胞培養(yǎng)皿的口腔黏膜細胞，培養(yǎng)至融合時所獲得細胞數量明顯多于接種于無3T3 細胞培養(yǎng)皿的口腔黏膜細胞。兩種方法培養(yǎng)的口腔黏膜細胞行免疫熒光染色，均呈綠色熒光。HE 染色觀察，BAMG 經脫細胞處理后未見細胞，脫細胞效果良好。復合培養(yǎng)1 周后，HE 染色及掃描電鏡觀察口腔黏膜細胞與BAMG 復合良好。 結論 兔口腔黏膜細胞可在體外成功培養(yǎng)、擴增，與同種異體BAMG 復合后生長良好，為構建組織工程尿道提供了一種新的選擇。
引用本文： 李超,徐月敏,宋魯杰,崔磊,尹爍. 應用組織工程口腔黏膜重建尿道的初步實驗研究. 中國修復重建外科雜志, 2008, 22(10): 1242-1245. doi: 復制
版權信息： ?四川大學華西醫(yī)院華西期刊社《中國修復重建外科雜志》版權所有，未經授權不得轉載、改編