目的 研究嗅鞘細胞（olfactory ensheathing cells，OECs）培養(yǎng)液對正常及損傷脊髓神經(jīng)元的影響，進一步探討OECs 促進及保護脊髓神經(jīng)元的作用機制。 方法 取成年SD 大鼠OECs 制備OECs 培養(yǎng)液（OEC culturemedium，OECCM），倒置相差顯微鏡觀察細胞形態(tài)，行兔抗大鼠低親和力神經(jīng)生長因子受體p75 抗體（nerve growth factorreceptor p75，NGFR p75）細胞免疫組織化學(xué)染色觀察及純度計算。取孕15 ～ 17 d SD 大鼠制備脊髓神經(jīng)元，并以H2O2 制備損傷模型。觀察OECCM 對正常胚胎SD 大鼠脊髓神經(jīng)元生長發(fā)育的影響實驗分為對照組（A 組）和實驗組（B 組）， OECCM 對H2O2 致脊髓神經(jīng)元損傷模型的影響實驗也分為對照組（C 組）和實驗組（D 組）。A、C 組每孔加200 μL 完全培養(yǎng)基，B、D 組每孔加100 μL OECCM 和100 μL 完全培養(yǎng)基。4 組細胞均作活性MTT 比色分析。 結(jié)果 OECs 培養(yǎng)6 ～ 9 d 后，細胞多呈雙極形或梭形；脊髓神經(jīng)元胞體較大，多呈圓形，培養(yǎng)5 ～ 7 d 后，突起明顯生長，多為雙突起。NGFRp75 細胞免疫組織化學(xué)染色觀察示OECs 細胞膜棕色深染，胞體清晰，呈梭性或三角形；OECs 純度 gt; 90%。培養(yǎng)6 ～ 9 d 后，與A 組相比，B 組細胞生長旺盛，密度較高，胞體明顯增大。A 組胞體平均直徑、單個神經(jīng)元突起數(shù)目及細胞突起長度分別為（33.38 ± 6.80）D/μm、（1.67 ± 0.80）個和（91.19 ± 62.64）L/μm，B 組分別為（37.39 ± 7.28）D/μm、（1.76 ± 0.82）個和（121.33 ± 81.13） L/μm，兩組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.05）。A 組MTT 比色法所測吸光度（A）值為0.402 0 ±0.586 9，B 組為0.466 0 ± 0.479 0，兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.01）。損傷后2 h，C、D 組細胞數(shù)量明顯減少，存活的神經(jīng)元胞體皺縮、胞膜不清楚，細胞突起明顯回縮或斷裂。C 組MTT 比色法所測A 值為0.149 0 ± 0.030 0，D 組為0.184 0 ±0.052 0，兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.01）。 結(jié)論 OECCM 可促進正常脊髓神經(jīng)元生長，對損傷脊髓神經(jīng)元有一定保護作用，OECs 分泌的促神經(jīng)生長因子是OECs 發(fā)揮脊髓神經(jīng)元保護作用的機制之一。
引用本文： 姬振偉,錢濟先,韓建偉,范清宇. 嗅鞘細胞對正常及損傷脊髓神經(jīng)元的保護作用. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2009, 23(1): 21-25. doi: 復(fù)制
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