目的 研究人羊水來源干細胞（human amniotic fluid colony derived stem cells，hAFCSCs）是否參與小鼠肌肉損傷修復過程，探討應用hAFCSCs 治療肌肉損傷的方法及可行性。 方法 B 超引導下穿刺抽取人孕中期羊水，體外分離、培養(yǎng)得到hAFCSCs，取第6 ～ 8 代細胞備用，同時提取總RNA 行RT-PCR 鑒定干細胞相關基因。取16 只6 ～ 8周齡Nod/Scid 小鼠，體重20 ～ 24 g，利用心肌毒素聯(lián)合X 線照射建立雙側脛骨前肌肌肉損傷模型，右側脛骨前肌內注射hAFCSCs（3.3 × 107 個/mL）30 μL 作為實驗組，左側脛骨前肌同法注射等量完全培養(yǎng)液（含15%FBS、18%Chang B2%Chang C、1% 青鏈霉素、1%L- 谷氨酰胺的α-MEM 培養(yǎng)基）作為對照組。細胞移植術后2、4 周各處死小鼠8 只，取材行肝細胞生長因子受體（c-Met）、成肌調節(jié)因子（Myf-5）、層粘連蛋白（Laminin）、結蛋白（Desmin）與人特異性細胞核有絲分裂器（NuMa）組織免疫雙重熒光染色觀察。 結果 原代hAFCSCs 培養(yǎng)5 ～ 7 d 后可見細胞克隆形成；8 ～ 10 d 后可挑取細胞形態(tài)均一的克隆進行穩(wěn)定傳代，6 ～ 8 代后可獲得足量的干細胞。RT-PCR 檢測示所獲得hAFCSCs 體外擴增培養(yǎng)至第6 代仍表達干細胞相關基因。細胞移植術后2 周免疫雙重熒光染色示，實驗組脛骨前肌內檢測到NuMa 表達，未檢測到hAFCSCs 表達肌源性細胞相關表型；術后4 周，實驗組脛骨前肌內檢測到NuMa 表達，部分細胞同時表達NuMa和c-Met、Myf-5，部分肌纖維同時表達NuMa 和Desmin、Laminin。術后2、4 周，對照組脛骨前肌均未檢測到NuMa 表達。 結論 hAFCSCs 體外培養(yǎng)后移植到小鼠肌肉損傷部位，可參與損傷肌肉的修復過程。
引用本文： 馬曉榮,張勝利,尚亞峰,高同斌,王雪,陳方,周君梅. 人羊水來源干細胞參與小鼠損傷肌肉修復的實驗研究. 中國修復重建外科雜志, 2011, 25(7): 842-847. doi: 復制
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