目的 甲潑尼龍(methylprednisolone,MP)是治療急性脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)的惟一有效藥物,但其作用機制尚未明確。通過觀察MP 對SCI 早期基因表達譜的影響,從基因表達層面探討其機制。 方法 采用重復(fù)樣本和重復(fù)基因芯片檢測的方法進行實驗。取9 只健康成年日本大耳白兔,體重(3 100 ± 140) g,隨機分為對照組(A 組)、模型組(B 組)和藥物組(C 組),每組3 只。A 組僅進行椎板切除術(shù),B、C 組行椎板切除后采用Allen 法建立急性SCI 模型。C 組在造模后2 h 按人- 兔等效劑量給予大劑量MP 沖擊治療,B 組注射等量生理鹽水,A 組不作處理。造模后8 h 處死實驗動物,分別獲取以損傷區(qū)為中心長約8 mm 的脊髓組織,采用Trizol 法提取總RNA,用9 張Agilent 兔脊髓組織全基因4 × 44 K 芯片進行檢測。采用GeneSpring11.0 統(tǒng)計軟件,以P lt; 0.05 且倍數(shù)變化(fold change,F(xiàn)C)≥ 2 篩選出差異表達基因,并對部分差異表達基因行RT-PCR 驗證。 結(jié)果 成功建立SCI 動物模型并獲得相應(yīng)的組織標本。各組總RNA質(zhì)量均能滿足基因芯片檢測要求?;蛐酒Y(jié)果顯示:在SCI 早期大劑量MP 治療后許多基因發(fā)生表達變化,主要涉及炎癥、先天性免疫、離子通道、物質(zhì)轉(zhuǎn)運和轉(zhuǎn)錄因子等,IL-1α、IL-1β 和防御素(defensin 4,NP-4)的RT-PCR 檢測結(jié)果與基因芯片結(jié)果相符。其中,先天性免疫相關(guān)基因如NP-3、NP-4、皮質(zhì)素6、內(nèi)源性抗菌肽CAP-18、抗菌肽等呈現(xiàn)顯著的差異性表達。 結(jié)論 大劑量MP 可能主要通過免疫調(diào)節(jié)機制發(fā)揮神經(jīng)功能保護作用,其主效應(yīng)細胞可能是中性粒細胞
引用本文: 黃穎,王輝,張春強,王兵,黃河,趙學(xué)凌. 大劑量甲潑尼龍對脊髓損傷早期基因表達譜的影響. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2011, 25(3): 327-333. doi: 復(fù)制
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