• 1.西安交通大學第二醫(yī)院普外科（西安710004）;;
  • 王煒現在四川大學華西醫(yī)院普外科（成都610041）;;
  • 2.第四軍醫(yī)大學西京醫(yī)院消化科（西安710006）;

目的通過對半胱氨酸蛋白酶3（Caspase3）大、小亞基的重組，構建pcDNA3.1(+)/rCaspase3真核表達質粒,并探討rCaspase3基因誘導細胞凋亡的可能性，以尋求腫瘤基因治療的新途徑。方法采用分子生物學方法克隆Caspase3的大、小亞基，并在體外進行重新排列組合，使大、小亞基原來的排序顛倒，構建出pcDNA3.1(+)/rCaspase3真核表達質粒； 脂質體瞬時轉染人胰腺癌細胞PCⅡ,RTPCR檢測rCaspase3 mRNA的表達； 流式細胞技術（FCM）檢測轉染胰腺癌細胞凋亡狀況。結果Caspase3的大、小亞基被完整克隆，pcDNA3.1(+)/rCaspase3真核表達質粒測序結果證實小亞基位于大亞基之前； RTPCR擴增出894 bp大小片段，流式細胞檢測可見明顯的凋亡峰出現。結論構建的rCaspase3其mRNA可在胰腺癌細胞中表達并自催化誘導細胞凋亡，可作為胰腺癌基因治療的目的基因。

引用本文： 王煒,劉志國,秦兆寅. 重組型Caspase3基因的構建及其在胰腺癌細胞中凋亡活性的觀察. 中國普外基礎與臨床雜志, 2002, 9(4): 249-251. doi: 復制

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1. Srinivasula SM, Ahmad M, MacFarlane M, et al. Generation of constitutively active recombinant Caspases3 and 6 by rearrangement of their subunits [J]. J Biol Chem, 1998; 273(17)∶10107.
2. FernandesAlnemri T, Takahashi A, Armstrong R, et al. Mch3, a novel human apoptotic cysteine protease highly related to CPP32 [J]. Cancer Res， 1995; 55(24)∶6045.
3. Hinz S, Trauzold A, Boenicke L, et al.BclXL protects pancreatic adenocarcinoma cells against CD95 and TRAILreceptormediated apoptosis [J]. Oncogene, 2000; 19(48)∶5477.
  1. 1. Srinivasula SM, Ahmad M, MacFarlane M, et al. Generation of constitutively active recombinant Caspases3 and 6 by rearrangement of their subunits [J]. J Biol Chem, 1998; 273(17)∶10107.
  2. 2. FernandesAlnemri T, Takahashi A, Armstrong R, et al. Mch3, a novel human apoptotic cysteine protease highly related to CPP32 [J]. Cancer Res， 1995; 55(24)∶6045.
  3. 3. Hinz S, Trauzold A, Boenicke L, et al.BclXL protects pancreatic adenocarcinoma cells against CD95 and TRAILreceptormediated apoptosis [J]. Oncogene, 2000; 19(48)∶5477.